Eur J Nutr. 2005 Mar;44(2):95-104. Proteome analysis for identification of target proteins of genistein in primary human endothelial cells stressed with oxidized LDL or homocysteine. (在氧化低密度脂蛋白或同型半胱氨酸所抑制原代人内皮细胞中——用蛋白质组分析确定5, 7, 45-三羟(基)异黄酮的靶蛋白) Fuchs D, de Pascual-Teresa S, Rimbach G, Virgili F, Ambra R, Turner R, Daniel H, Wenzel U. 背景:流行病学研究表明大豆消费有助于阻止冠心病的发生。据推测大豆的抗动脉粥样硬化的作用看起来好象是富含5, 7, 45-三羟(基)异黄酮成分的异黄酮类化合物的效果。实验目的:确定5, 7, 45-三羟(基)异黄酮施加其保护作用的蛋白或途径。我们分析了在暴露于氧化低密度脂蛋白或同型半胱氨酸下人脐静脉内皮细胞蛋白质组的反应。方法:HUVEC与生理浓度的同型半胱氨酸或氧化低密度脂蛋白在食用富含大豆产物(2.5 微摩尔)以及药物干预浓度(25 微摩尔)5, 7, 45-三羟(基)异黄酮的缺乏或者存在的条件下共同孵育。从HUVEC中获取的蛋白进行二维PAGE分析,在胰蛋白酶消化蛋白点后肽指纹谱分析5, 7, 45-三羟(基)异黄酮的差异表达。结果:发现几个蛋白不同程度的受5, 7, 45-三羟(基)异黄酮的影响。用同型半胱氨酸处理而被大大下调了的最感兴趣蛋白有annexin V 和lamin A。annexin V 是一种抗动脉粥样硬化的分子,发现在细胞核内 lamin A 的变异导致高血压相关的血浆脂质紊乱。5, 7, 45-三羟(基)异黄酮在低或高浓度下均可逆转应激原诱导的这些抗动脉粥样硬化蛋白的降低。氧化低密度脂蛋白处理HUVEC导致泛素连接酶12 的升高,这种蛋白涉及泡沫细胞形成。两种剂量的5, 7, 45-三羟(基)异黄酮逆转了这种效果。结论:蛋白质组分析让我们认识到了饮食成分与动脉粥样硬化进展相关分子的潜在相互作用,并且由此获得了一种确认生物活性标记物的有力工具。(谭玉林编译)< td> |
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