南华大学药物药理研究所简介
南华大学药物药理研究所由血管生物学研究中心、细胞跨膜信号转导研究室、药物蛋白质组学研究室、组合药物与天然药物研究室、SNP研究中心、细胞增殖与分化调控研究室、生物工程技术研究生等组成。为湖南省重点学科，湖南省“动脉硬化学”重点实验室主要基地。现有教研人员34名，其中教授9名，副教授10名。有全国优秀教师1名，享受国务院特殊津贴专家2名，湖南省121人才工程第一层次人选1名，省高校跨世纪学术带头人2名、省优秀中青年专家2名、湖南省模范教师1名，省青年骨干教师10名；博士生导师2名，硕士生导师10名，留学归国人员7人。教师中有博士学位者12名，硕士学位者12名，在读博士研究生5名。现有在读博士研究生8名、硕士研究生58名。
研究所拥有流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、分子模拟系统、2D电泳系统、高效液相色谱仪、中压制备色谱、快速蛋白层析仪、荧光倒置生物显微镜、荧光定量PCR仪、旋转薄膜蒸发仪、百级超净工作间和智能型生物信号采集与分析系统、超速冷冻离心机等大型精密仪器。有1200平方米的实验场地，设备齐全，环境优良。 近5年来，共获得国家自然科学基金资助11项，教育部、卫生部、湖南省自然基金、湖南省重大、重点项目等20余项, 与苏州大学联合申请863项目1项，参加国家973项目2项。
主要研究方向有：
1．动脉硬化原理及其药物蛋白质组学
1）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和血管重塑的蛋白质信号通路与药物干预研究。主要研究氧化应激（如活性氧、ox-LDL）和血管紧张素Ⅱ对VSMC增殖及其信号传导的影响，发现氧化应激可刺激VSMC释放MAPK激活因子（J. Biol Chem 2000，275：189；Circ Res 2000，87：789）；阐明了血管紧张素II刺激VSMC增生的信号：Ras→PKC-ξ→MEK→ERK1/2途径（Circ Res 1996，79：1007；J. Biol Chem 1997，272：6146）；发现丝氨酸331是TP－α受体磷酸化和脱敏的主要和关键部位（Acta Pharmacol Sin 2002，23：952）；发现中、晚期高血压大鼠动脉硬化普遍存在重构，ACE抑制剂（Perindopril）和AT1-R拮抗剂（Losartan）均能通过促进CGRP释放、抑制VSMC ERK1/2活性逆转血管重构（Eur J Pharmacal 2003，464：63-67；488：45-49; Eur J Pharmacol 2007; 570(1-3):125-134.）。该研究2005年获湖南省科技进步二等奖。
2）血管内皮细胞（EC）损伤和凋亡的蛋白质信号通路与药物干预研究。发现氧化应激（ox-LDL、活性氧等）抑制血管内皮细胞一氧化氮合酶（NOS）和环氧酶活性及损伤内皮细胞分泌NO、PGI2、vWF和cGMP的能力，促进粘附分子p-selectin表达（Acta Pharmacol Sin 2000，21：637）；发现普罗布考、金粉蕨素、吴茱萸次碱等可通过调节内皮细胞小凹蛋白-1→eNOS→NO通路对抗氧化应激所致的内皮细胞损伤，促进受损内皮再生，防止内皮细胞调亡（Life Sci 2004，76：487-497；N-S Arch Pharmacol 2004，370：314-319； Acta Pharmacol Sin 2005，76：205-211），为开发湘桂滇黔地区丰富的药用资源金粉蕨防治心血管疾病作用提供了实验依据（已申请专利1项）。该研究2006年获教育部高校自然科学二等奖。
3）内皮细胞与白细胞（单核细胞、中性粒细胞）相互作用过程中蛋白质信号通路与药物干预研究。发现氧化应激可促进内皮细胞表达NF-κB、ICAM-1等与细胞粘附相关的信号分子和粘附分子，促进单核巨噬细胞分泌IL-1β，促进单核-内皮细胞粘附（Endothelium 1998，6：1）和内皮细胞-中性粒细胞粘附。普罗布考、雷帕霉素等可通过调节cyclophilin A→ERK1/2→NF-κB→ICAM-1信号通路抑制内皮细胞与单核细胞、中性粒细胞粘附（Acta pharmacol Sin 2002，23：516；生理学报 2004，36：313-320）；采用噬菌体表面展示技术，筛选内源性抗粘附短肽，已获选短肽10个（Acta Biochim Biophys Sin 2005，37：227-233; Cardiovasc Drugs Ther 2007；21(1)：37-45）。
4）荷脂细胞胆固醇逆转运过程中蛋白质相互作用及调控策略研究。提出了荷脂细胞胆固醇流出 “四个体系、一个中心、偶联转运、网络调控”的工作模式，并采用ox-LDL诱导的单核细胞源性和VSMC源性泡沫细胞模型及清道夫受体A转基因小鼠和Apo E基因敲除小鼠，研究细胞胆固醇流出和药物干预机制。发现小凹蛋白-1（caveolin-1）在介导和促进胆固醇流出过程中特别在胆固醇由胞内向胞膜转运过程中起重要作用（Acta Pharmacol Sin 2006; S1:144），小凹蛋白－1的作用受Daxx和SREBP活性的调控，并与位于细胞膜小凹结构（caveolae）上的胆固醇转运体系SR-B1和 ABC-A1相偶联。并发现姜黄素、高密度脂蛋－3、普罗布考等可作用于小凹蛋白-1及其通路，促进胆固醇流出、抑制OxLDL诱导的单核/巨噬细胞凋亡（Acta Pharmacol Sin 2006，27:151-157；Cardiovascular Drugs Therapy 2007，）。并通过人工半合成的方法获的一系列可促进胆固醇逆转运的含烟酸异黄酮酯衍生物（已申请国家专利）。
5） 脂蛋白脂酶活化剂调节血脂代谢作用的研究。该方向与日本德岛大塚制药厂以及以色列NEURIM PHARMACEUTICAL Ltd合作研究开发了一系列脂蛋白脂酶活化剂。我们已经并正在进一步研究其中NO-1886和Neurim-20、Neurim-21调节血脂代谢的作用。主要研究NO-1886和Neurim-20、Neurim-21对高密度脂蛋白和甘油三酯及胆固醇逆向转运相关基因的影响。发现合成化合物NO-1886使高脂高蔗糖饲料喂养的实验动物总胆固醇和甘油三酯降低，高密度脂蛋白胆固醇增加，对动脉粥样硬化的发展具有抑制作用（J Endocrinol. 2004, 180:399-408; Arzneimittelforschung. 2002;52:610-4）。Neurim-20也有以上作用，但对肝脏的毒性更小(待发表)；阐明了NO-1886可以促进脂肪组织、心肌和骨骼肌的脂蛋白脂酶mRNA表达，提高脂蛋白脂酶活性，使致动脉粥样硬化型脂蛋白谱转变为抗动脉粥样硬化型脂蛋白谱，从而起到抗动脉粥样硬化的作用(Cardiovasc Drug Rev. 2003, 21:133-42.)。该方向还深入研究了NO-1886和Neurim-20、Neurim-21调节胆固醇逆向转运的作用及机制。用NO-1886和Neurim-20、Neurim-21治疗高胆固醇高糖喂养的小型猪，然后测定胆固醇合成速率、HDL胆固醇酯转运率、粪便中固醇类排泄量、血浆脂质和ApoA-I及肝脏胆固醇浓度，观察和分析NO-1886对胆固醇逆向转运的各主要环节，如对新生HDL ，对组织SR-BI、LDL 受体、ABC超家族基因、LCAT、apoA-I、LXR 和RXR mRNA水平等的影响，并定性、定量分析动脉动脉粥样硬化病变，以阐明NO-1886对胆固醇逆向转运各主要环节的作用及其机制，同时为这一类新药进入临床抗动脉粥样硬化研究奠定基础(Eur J Pharmacol 2006; 540:139-146; J Lipid Res. 2006; 47(9): 2055-63)
2．基因变异检测技术平台与方法研究
通过对高保真DNA聚合酶的保真性进行研究，我们发现高保真DNA聚合酶对错配碱基的识别，不仅仅局限于新生DNA分子或引物3’末端，而且也能识别3’末端上游一至数个碱基距离的错配。根据高保真聚合酶的这一特征，可以认为，高保真聚合酶对DNA合成时的错配碱基存在一个“识别→逸漏→反复识别”的过程，当引物与模板完全配对时，则在聚合中心直接进行聚合反应；当引物与模板不完全配对时，则送到酶解中心进行校正，其中一部分引物被校正后，即时送回聚合中心，继续聚合反应，而另一部分引物由于不能被即时校正，引发聚合反应的非成熟性终止。这种配对引物被延伸，不配对引物不延伸的有或无的二元化效果，能较好地满足SNP分析时对特定位点进行非此即彼的二元化辨认。据此，我们提出复合分子“开/关”理论，即将耐外切酶消化的硫化磷酸修饰的碱基特异性引物与具3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶相结合，而构成的受单碱基差异调控的纳米级复合分子“开/关”。并建立了相关技术平台，用于EGF受体突变检测、高血压基因SNP多态性检测和胎儿遗传缺陷检测。该项研究在国内外期刊（如Lab Invest 2003; 83(8): 1147-1154， Trends Biotech 2005; 23(2): 92-96, 等）发表相关论文20余篇，被SCI收录16篇（IF最高达8.606, Trends Biotech），申请专利3项。
3．肿瘤细胞信号转导及其干预药物的筛选
近年来该方向主要研究了巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）介导的信号转导对白血病细胞Automation的调控机制与作用；率先证明了m-M-CSF与重组人M-CSF可溶性受体（rh-M-CSF-sR）的结合具有高亲和性，且m-M-CSF能介导能量和温度依赖的rh-M-CSF-sR/ m-M-CSF复合物内化；内化的rh-M-CSF-sR 能以m-M-CSF结合的形式重新回到细胞表面， m-M-CSF有受体样介导内吞和再循环的作用（Chin Sci Bull. 2000, 45:1697-1703），为膜结合型M-CSF介导的反向信号，细胞并置性刺激（juxtacrine），细胞信号由内向外（side in-out）与由外向内（side out-in）等理论提供了有力的实验佐证；同时还率先发现了M-CSF及其受体在HL-60细胞中存在复合物的形式，并证明HL-60细胞存在组成性M-CSF及其受体external autocrine loop和intracrine loop两种调节方式（Leukemia Res 2001,64:1107-1114，J Leukocyte Biol. 1999, 64:19）；这些发现丰富了细胞因子及其受体的信号转导理论和肿瘤细胞自律性生长理论，达到国际先进水平，并获得了国家自然科学基金与湖南省杰出中青年基金的资助。我们根据M-CSF受体介导信号转导的调控机制，设计建立重组药物筛选细胞系（STAT1/ GFP-HL-60），并以此细胞系为模型筛选得到一些对M-CSF受体与STAT1高表达肿瘤细胞具有很强抑制效应的中草药有效成分和小分子多肽，目前正在申请专利。此外我们还研究了Diallyl disulfide（DADS）对肿瘤细胞增殖周期的影响，率先证明了DADS可 通过活化p38 激酶、诱导p21表达下调、诱导cyclinB1亚细胞分布改变启动HL-60细胞G2/M 校正点，部分研究结果发表在Cell Research等杂志上, 并获得湖南省自然科学基金重点项目的资助。
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