低密度脂蛋白受体(LDLR) 广泛存在于体内，其中肝脏最为丰富。LDLR 在主动脉中膜层吸收和降解低密度脂蛋白(LDL) 方面起重要作用[1]。本研究旨在通过建立家兔动脉粥样硬化(AS) 模型，调查LDLR 基因表达改变与AS的关系，同时检测家兔主动脉和肝脏152脂氧化酶mRNA的改变，分析152脂氧化酶基因表达与AS之间的联系。

    材料和方法　纯种日本大耳白兔(家兔) 40 只，均为雌性, 兔龄8 周，体重118～2.2kg，将家兔随机分为两组。正常组：喂普通糖化饲料；AS组：喂含1% 胆固醇糖化饲料。10～12周处死动物。剪取0.15g 肝组织和全长胸腹主动脉(013～0.5g)，撕去主动脉外膜层，剪碎后加液氮研磨成粉末，转移至50ml厚壁塑料离心管，然后按Chomczynski 和Sacchi[2]的方法进行组织RNA提取。取2～5LlTE 溶解的组织总RNA，岛津UV 212022 分光光度计测量260nm 和280nm 处的吸光度A (旧称光密度OD ) (260 和280)，计算RNA 浓度。RNA 的印迹转移、杂交和信号检测参照《分子克隆》一书所述的方法进行。统计学处理采用配对资料t 检验。

    结果　处死动物时A S 组家兔主动脉有明显A S斑块，对照组家兔主动脉正常。肝脏和主动脉RNA 提取量分别为500～ 1300Lg 和150～ 250Lg，其吸光度A 280 和A 260 的比值分别为117～ 119 和116～ 118。甲醛凝胶变性电泳示RNA 完整性好，溴化乙锭染色示各道RNA 样品量基本一致。用32P2dCTP 标记cDNA 探针与组织总RNA 做斑点杂交，结果显示： (1)A S 家兔肝脏和主动脉LDLR mRNA 丰度均高于正常家兔相应组织，A S 主动脉LDLR mRNA 增加更明显； (2) 与正常家兔相比，A S 家兔肝脏152脂氧化酶mRNA 明显降低，主动脉152脂氧化酶mRNA 丰度明显升高。地高辛标记cDNA 探针与组织总RNA 狭缝杂交的结果示两组动物不同组织B2act in mRNA 杂交信号基本一国家科委科研基金资助项目致(P>0.05)，AS家兔的肝脏和主动脉LDLR mRNA丰度均较正常家兔相应组织明显增高(P值分别<0.05和<0.01)，AS家兔主动脉152脂氧化酶mRNA 丰度比正常家兔主动脉明显增高(P<0.01)。

    讨论　本实验显示AS主动脉LDLR mRNA 较正常明显升高，说明A S 主动脉通过LDLR 途径吸收LDL 增加。因为A S 病灶内吞噬细胞的LDL 代谢主要通过吞噬受体途径[3]，所以这种LDLR mRNA 增加主要来源于平滑肌细胞。A S 兔肝组织和主动脉LDLR 基因表达均未受到高胆固醇血症的抑制，或许与体内细胞因子的作用有关。152脂氧化酶是存在于网状内皮细胞和主动脉内皮细胞等多种细胞内的一种氧化酶，Ylab2Hert tuata 等[4]曾通过原位杂交显示152脂氧化酶mRNA 和乙酰化LDLR mRNA、氧化型LDL 共存于A S 病灶内。本试验结果支持152脂氧化酶参与了A S发病。A S 肝脏152脂氧化酶mRNA 显著减少的机理不明。我们认为：(1) 非氧化型LDL 作为血浆中LDL 的主要形式，大部分通过LDLR 受体途径进入主动脉壁内的平滑肌细胞。A S 状态下，主动脉平滑肌细胞表型从收缩型向合成型转变，后者代谢LDL 能力显著降低使胆固醇在细胞内堆积；(2) 主动脉壁内平滑肌细胞152脂氧化酶活性增加促进了LDL 在平滑肌细胞内的氧化，生成氧化型LDL。氧化型LDL 在细胞内难于代谢而导致细胞内脂质堆积和A S。

    动脉粥样硬化情况下低密度脂蛋白受体基因和152脂氧化酶基因的表达异常