摘要
目的：研究海豹油对家兔血脂、脂质过氧化及动脉粥样硬化斑形成的影响。
方法：用喂饲高胆固醇食物和猪油的办法建立16只家兔动脉粥样硬化模型,随机分为海豹油组(高脂饲料+海豹油)和对照组(高脂饲料)。
结果：连续给药8周后,海豹油组较对照组总胆固醇、甘油三酯显著降低(P<0.01<0.05),高密度脂蛋白、超氧化物歧化酶显著升高(P<0.01)。
结论：海豹油对心血管病防治和康复具有重大意义。
关键词 海豹油;血脂;脂质过氧化;动脉粥样硬化
Effects of seal oil on experimental atherosclerosis in rabbits
YANG Jian,LU Ronghua,SUN Wei,et al.
Chinese Journal of Cardiovascmlar Rebabilitation Medicine,1998,7(2):25
Abstract
Objective:Effects of seal oil on atherosclerosis in rabbits were studied.Methods:16 rabbits with atheroscleroses were divided into seal oil group(highfat food+seal oil) and control group (highfat food).Results:Comparing with control,the serm TC,TG,MDA in seal oil group decrased obviously,(P<0.01,<0.05) and the HDL-C,SOD level markedly increaes(P<0.01) after 8 weeks.Conclusion:seal oil is important for preventing and rehabilitating the cardiovascular disease.
Author's address China Rehabilitation Research Center,Beijing,100077
Key Words Seal oil;Serum lipid;Atherosclerosis
海豹油从海豹脂肪组织压榨提取，富含n-3不饱和脂肪酸。早在70年代,流行病学调查就发现以海豹和海鱼为主要食物的爱斯基摩人极少患心血管系统疾病［1］。近年的研究证实富含二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的鱼油可以调整血脂、抗动脉硬化、抑制血栓形成［2］，从而确立鱼油防治心血管病的作用。海豹油在不饱和脂肪酸的结构和组成上与鱼油有所差异，它在心血管病方面作用的实验研究目前尚未见报道。本实验用家免制作动脉粥样硬化模型，研究了海豹油对血脂、脂质过氧化和动脉粥样硬化斑形成的影响。
1 材料与方法
1.1 药品和试剂
海豹油由本所生化免疫室提供。血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒购自北京中生生物工程高技术公司。超氧化物歧化酶和丙二醛测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.2 实验动物
新西兰大耳白家兔，体重2~3kg，雌雄各半，由中国药品生物制品检定所提供。
1.3 动脉粥样硬化模型及给药方法
取24只家兔，随机分为普食、高脂和海豹油3组。普食组喂普通饲料，其余两组给予高脂饲料(普通饲料加胆固醇0.5g/kg/日，猪油2～5g/kg/日)，海豹油组同时给予海豹油(2g/kg/日)。各组均按上法连续喂饲8周。
1.4 血脂测定
喂饲8周后，于各组家兔耳缘静脉取血分离血清，按试剂盒方法分别测定血清总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)。
1.5 脂质过氧化测定
按试剂盒方法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)。
1.6 主动脉染色及病理观察
处死动物后，取出主动脉纵行切开，10%福尔马林固定，苏丹Ⅲ染色，按主动脉内膜病变分级标准肉眼对主动脉内膜硬化斑定级［3］，病变级别数据用统计学处理，而后石醋包埋切片，HE染色，显微镜观察。
2 结果
2.1 海豹油对血脂的影响
结果表明，给予高脂饲料8周后，家兔血清TC、TG均较普食组显著升高，而HDL-C/TC比值明显降低。但在相同饲养条件下，给予海豹油的家兔，其血脂变化与高脂组相比表现为TC、TG显著降低，HDL-C和FDL-C/TC比值升高，见表1。
表1 海豹油对家兔血脂水平的影响(mg/dl，x±s)
| 组 别 |
TC |
TG |
HDL-C |
HDL-C/TC |
| 普食组 |
46.40±21.54 |
47.13±12.61 |
24.32±0.99 |
0.62±0.25 |
| 高脂组 |
305.65±46.22 |
80.45±6.04 |
32.67±6.92 |
0.13±0.04 |
| 海豹油组 |
171.28±5.06＃＃ |
61.30±22.13＃ |
52.31±17.32＃＃ |
0.39±0.13＃ | 与普食组比较：P<0.05,P<0.01 与高脂组比较：＃P<0.05,＃＃P<0.01
2.2 海豹油对脂质过氧化的影响
家兔用高脂饲料喂养8周后，血清SOD水平下降，MDA显著升高。海豹油组SOD没有出现下降的变化，仍维持与普食组相似的水平。MDA与普食组相比虽有升高，但升高幅度明显低于高脂组，见表2。
表2 海豹油对家兔脂质过氧化的影响(x±s)
| 组 别 |
SOD(un/ml) |
MDA(nmol/ml) |
| 普食组 |
78.89±5.09 |
3.72±0.79 |
| 高脂组 |
65.73±4.37 |
25.31±5.08 |
| 海豹油组 |
74.63±0.93＃＃ |
19.67±2.24＃ | 与普食组比较：P<0.05,P<0.01与高脂组比较：＃P<0.05,＃＃P<0.01
2.3 海豹油对主动脉内膜斑块形成的影响
各组家兔主动脉经苏丹Ⅲ染色后肉眼观察，硬化斑形成有明显差异。普食组家兔主动脉内膜表面光滑，无苏丹Ⅲ染色。高脂组家兔主动脉内膜表面粗糙，有大片苏丹Ⅲ着色极深的硬化斑，多分布于主动脉弓和头臂下动脉分叉的根部，表示出典型的动脉粥样硬化病变。海豹油组家兔只在主动脉弓处有少量散在硬化斑，苏丹Ⅲ着色较淡，动脉内膜病变定级分析表明，海豹油组家兔主动脉内膜粥样硬化斑形成明显减弱，见表3。主动脉病理切片显示普食组家兔动脉壁内皮完整，内膜较薄，中膜平滑肌和弹性纤维排列规整。高脂组家兔主动脉内皮损伤，内膜增厚，可见很多泡沫细胞，增生的内皮层细胞突入管腔，使血管腔明显狭窄，中膜细胞间纤维成分增生，排列略显紊乱。海豹油组家兔主动脉内膜损伤较轻，无明显增厚或突入管腔现象，中膜细胞间纤维成分中轻度增生。表明海豹油对内膜病变具有抑制作用。
表3 海豹油对家兔动脉粥样硬化斑形成的影响(x±s)
| 组 别 |
病变级别 |
| 普食组 |
0 |
| 高脂组 |
2.87±1.46 |
| 海豹油组 |
1.23±0.65＃ | 与普食组比较：P<0.01；与高脂组比较：＃P<0.05
3 讨 论
近年来大量研究工作已使人们对鱼油防治心血管病的功能有了全面深入的认识［4］，但海豹油的研究仍限于少量的流行病学调查和对其成分的分析，对海豹油功能的研究和评价，目前很少。
海豹油来源于海豹皮下脂肪组织，内含多种n－3不饱和脂肪酸［5］，与鱼油比较，其不饱和脂肪酸组成和结构都有独特之处，如海豹油不饱和脂肪酸主要结合在甘油三酯的3位上(鱼油不饱和脂肪酸主要结合在2位上)［6］，这与其它海洋哺乳类动物相似，在结构上比鱼油更类似人体的成分。因此应对海豹油的功能做系统全面的研究，以便将来的开发利用。
我们的实验观察了海豹油对实验性家兔动脉粥样硬化的影响。结果表明海豹油对主动脉内膜斑块形成具有明显的抑制功能。海豹油显著降低血清TC、TG，升高HDL-C和HDL-C/TC比值，这在抑制动脉粥样硬化形成中发挥重要作用。海豹油防止SOD下降，减少MDA，说明海豹油可以调整SOD水平，抑制过多氧自由基产生，减少细胞膜脂质过氧化反应，保护动脉壁细胞。这些结果证明海豹油通过对血脂和脂质过氧化的调节，减少脂质沉积，维持内皮细胞的完整性，从而使动脉内膜粥样硬化斑形成减少，这对心血管病的防治和康复具有重要意义，同时也为海豹油的开发利用打下良好基础。
4 参考文献
1 Dyerberg J,Bang H O,Stoffersen E.Eicosapentaenioc acid and prevention of thrombosis and atherosclerosis?Lancet,1978,2:117
2 张岫美,吴葆杰鱼油不饱和脂肪酸防治心血管病的进展．中国药学志,1992,27(6)：330
3 徐淑云,卞如濂,陈修药理实验方法学北京人民卫生出版社,1982,1049~1050
4 王建中,邱红芳鱼油研究的现状和发展趋势中国海洋药物杂志,1993。2：34
5 Achman R G.Some possible effects on lipid biochemistry of differences in the distribution on glycerol of longchain n-3 fatty acids in the fats of marinefish and marine mammals.Atherosclerosis,1988,70:171
6 Brockerhoff H,Hoyle R J,Huang P C.Positional of fatty aceds in the fats of a polar bear and a seal.J Biochem,1966,44:1519
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